Introducción al núcleo de IGF-1 LR3 0.1mg/vial
Insulina-de acción prolongada-similar al factor de crecimiento-1 análogo|Microdosis 0,1 mg/vial
Nombre genérico: Análogo de cadena larga del factor de crecimiento 1 similar a la insulina-
nombre en ingles: Factor de crecimiento similar a la insulina-1 largo R3 (IGF-1 LR3)
Secuencia: Polipéptido de cadena sencilla- de 83 aminoácidos, con una extensión N-terminal de 13 péptidos, donde el ácido glutámico en la posición 3 se reemplaza por arginina.
Peso molecular: Aproximadamente 9100 Da
Pureza: Mayor o igual a 97,0% (HPLC)
Contenido: 0,1 mg/frasco (100 ug/frasco)
Apariencia: Trazas de polvo liofilizado blanco
Almacenamiento: Congelar a -20 grados, proteger de la luz y almacenar en un lugar seco.
Guía de uso y almacenamiento
Microforma de IGF-1 LR3 (0,1 mg/vial):
IGF-1 LR3 0.1mg es un producto en micro-dosis diseñado para estudios in vitro de precisión, especialmente adecuado para experimentos celulares a pequeña-escala, micro-detección y exploración de dosis preliminares. En comparación con las formulaciones convencionales, este micro-envase minimiza los riesgos de almacenamiento después de la apertura, lo que garantiza ingredientes frescos para cada experimento. Su extensión N-y su diseño de sustitución de aminoácidos reducen significativamente la afinidad por las proteínas de unión, lo que da como resultado una bioactividad 2-3 veces mayor que el IGF-1 natural y una vida media prolongada, lo que lo convierte en una herramienta altamente sensible para estudiar la proliferación, diferenciación y regulación metabólica celular.
Debido a su dosis mínima y su alta actividad, esta especificación es particularmente adecuada para investigadores que necesitan realizar múltiples pruebas de gradiente de concentración, detección de alto-rendimiento o estudios sobre líneas celulares valiosas. En comparación con productos más grandes que requieren múltiples reenvases, el envase individual de 0,1 mg evita la pérdida de actividad causada por ciclos repetidos de congelación-descongelación, lo que garantiza la coherencia de los datos experimentales. En experimentos in vitro que requieren un control de dosis preciso, como cultivo de células madre, investigación de células neurales y diferenciación de células musculares, esta especificación ofrece mayor flexibilidad operativa y estabilidad de reactivos.
Aplicaciones de microdosis de IGF-1 LR3:
Optimizado para experimentos in vitro de micro{0}}volumen y alta-precisión, este producto activa la vía de señalización posterior del receptor IGF-1, promoviendo significativamente la proliferación celular, la síntesis de proteínas e inhibiendo la apoptosis incluso en concentraciones bajas. Esta especificación es adecuada para estudios celulares que requieren un control de dosis preciso y una alta reproducibilidad, especialmente cuando se manipulan muestras preciosas o se realizan múltiples experimentos paralelos.
Esta especificación se utiliza ampliamente para: ① expansión in vitro y diferenciación dirigida de células madre; ② cultivo y mantenimiento funcional de células primarias (como mioblastos, neuronas y condrocitos); ③ controles positivos en plataformas de detección de drogas de alto-rendimiento; ④ adición de factores de crecimiento a sistemas de cultivo de micro-células (como placas de 96/384-pocillos); y ⑤ estudios preliminares de la relación dosis-respuesta de los mecanismos de las vías de señalización celular.
Métodos de uso y almacenamiento
1. Reconstitución y preparación:
Disolvente recomendado:
Debe usarse: Solución de ácido acético estéril 0,1 M con pH 3,5-4,5
Proteína portadora: Se recomienda reconstituir conuna solución de ácido acético de pH 4,0 que contiene albúmina sérica bovina (BSA) al 0,1%.
Dilución de la solución de trabajo: Diluir al menos 100 veces conPBS estéril o medio de cultivo completo que contenga 0,1% de BSA.
Nota importante: No disolver directamente en agua pura, solución salina fisiológica o PBS neutro., ya que esto provocará una agregación e inactivación irreversibles.
Procedimiento de preparación estándar:
Preparación de solventes:
La solución de ácido acético se trató utilizando un filtro estéril de 0,22 µm.
El disolvente debe precalentarse a 2-8 grados (no a temperatura ambiente).
Procedimiento de micro-reconstitución:
100 μL del disolvente recomendado en un vial de 0,1 mg.
Utilice una micropipeta para inyectar lentamente la muestra a lo largo del costado del vial, evitando el impacto directo sobre el polvo.
Coloque el vial en hielo ygírelo horizontalmente muy lentamentedurante 2-3 minutos hasta que el polvo se disuelva por completo.
Está estrictamente prohibido girar, vibrar o soplar.
Concentración final: 1 mg/ml (aproximadamente 0,11 mM) de solución madre ácida
Dilución de gradiente:
Primera dilución: Tome 1 μL de solución madre + 999 μL de PBS que contenga 0,1 % de BSA → 1 ug/mL (aproximadamente 110 nM) de solución intermedia.
Segunda dilución: diluya la solución intermedia a la concentración de trabajo según sea necesario (comúnmente 1-100 ng/ml).
La proporción de dilución recomendada es inferior o igual a 100 veces.
Reenvasado:
La solución madre ácida se distribuyó inmediatamente en 2-5 µl/tubo.
Utilice tubos de PCR de baja-adsorción o tubos de centrífuga silanizados.
Claramente etiquetado: IGF-1 LR3, concentración, fecha, número de lote
Referencia de concentración de trabajo:
Ensayo de proliferación celular.: 1-20 ng/mL
Experimento de inducción de diferenciación.: 10-50 ng/mL
Estudios de vías de señalización.: 0,1-10 ng/ml
Ejemplo de preparación y cálculo.: Concentración objetivo 10 ng/mL, tomar 1 μL de solución intermedia de 1 ug/mL y agregarlo a 100 μL de medio de cultivo.
Puntos clave a tener en cuenta:
Todo el proceso se realiza a bajas temperaturas.: los procesos de disolución y dilución se realizan en hielo.
Disolución ácida: La disolución inicial debe realizarse utilizando una solución de ácido acético de pH 4,0.
Disolución lenta: Sólo se permite una rotación horizontal lenta para la disolución.
De un solo uso: Se recomienda utilizar cada frasco de una vez después de la reconstitución.
Observa la solución: Debe quedar claro y transparente después de la disolución; cualquier solución turbia debe desecharse.
Para evitar la adsorción: Utilice una solución tampón que contenga 0,1 % de BSA y consumibles de baja-adsorción.
2. Condiciones de almacenamiento:
Polvo liofilizado no reconstituido:
Temperatura de almacenamiento: -20 grados, vida útil 12 meses;Se recomienda -80 grados para el almacenamiento.
A prueba de luz-y de humedad-: Bolsa original de papel de aluminio, sellada con desecante en su interior.
Posición fija: Evite movimientos frecuentes para evitar la dispersión del polvo.
Solución reconstituida:
Solución madre ácida: Después de reenvasar, almacene a -80 grados protegido de la luz durante menos o igual a 1 mes.
Dilución intermedia: Almacenar a -20 grados durante menos o igual a 1 semana
Solución de concentración de trabajo: Prepárelo fresco y úseloinmediatamente; Úselo dentro de las 4 horas.
Ciclos de congelación-descongelación: Los ciclos repetidos de congelación-descongelación están estrictamente prohibidos.; se permite un máximo de un ciclo de congelación-descongelación.
Condiciones de transporte:
debeser utilizado para el transporte.
El embalaje debe incluir una tarjeta de control de temperatura.
Tiempo de transporte Menor o igual a 72 horas
3. Control de estabilidad:
Estabilidad fisicoquímica:
Estable en ambientes ácidos (pH 3,5-4,5)
Sensibilidad a la temperatura: aproximadamente un 2-3 % de pérdida de actividad por hora a temperaturas superiores a 4 grados.
Sensibilidad mecánica: la oscilación puede provocar una pérdida de actividad de más del 50%.
Mantenimiento de la bioactividad.:
Respete estrictamente el principio de "disolver en soluciones ácidas y utilizar en soluciones neutras".
Una-dispensación única, ciclo único de congelación-descongelación
Descongelar rápidamente antes de usar y evitar dejarlo a temperatura ambiente.
Requisitos especiales para operaciones de micro-volumen:
Utilice una micropipeta calibrada.
Enjuague previamente-con una solución que contenga BSA al 0,1 % antes de cambiar las puntas de pipeta.
Todas las operaciones se completan dentro de un banco limpio.
Establecer un control negativo (que contenga sólo disolvente) para excluir la influencia de BSA.
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